डार्क फील्ड माइक्रोस्कोपी: आवश्यक कौशल और सिद्धांतों का ज्ञान
सबसे पहले, आइए डार्क फील्ड माइक्रोस्कोप की संरचना और विशेषताओं के बारे में बात करते हैं, क्यों इसे डार्क फील्ड माइक्रोस्कोप कहा जाता है, क्या प्रयोग इसका उपयोग कर सकते हैं, और इसे कैसे अच्छी तरह से उपयोग करें। आपको इस लेख की विस्तृत समझ होगी।
पहला डार्क फील्ड माइक्रोस्कोप की संरचना है। हमारे दैनिक जीवन में, पार्टिकुलेट डस्ट फ्लाइंग को घर के अंदर देखना आसान नहीं है, लेकिन एक अंधेरे कमरे में, अगर प्रकाश की एक किरण दरवाजे की दरार से स्पष्ट रूप से आती है, तो धूल के कणों को देखा जा सकता है, जो एक ऑप्टिकल डिंडर घटना है। डार्क फील्ड माइक्रोस्कोप इस सिद्धांत के आधार पर डिज़ाइन किया गया है। इसकी संरचनात्मक विशेषता मुख्य रूप से एक केंद्रीय छायांकन प्लेट या एक अंधेरे क्षेत्र कंडेनसर का उपयोग करने के लिए है, जिसे आमतौर पर एक परवलयिक कंडेनसर के रूप में उपयोग किया जाता है, ताकि प्रकाश स्रोत का केंद्रीय बीम अवरुद्ध हो और नीचे से ऊपर तक नमूना के माध्यम से उद्देश्य लेंस में प्रवेश न कर सके। ताकि प्रकाश अपने पथ को बदल देता है और अवलोकन किए गए नमूने पर विशिष्ट रूप से चमकता है, और जब यह प्रकाश से मिलता है तो नमूना दर्शाता है या स्कैटर करता है, और बिखरे हुए प्रकाश को उद्देश्य लेंस में डाल दिया जाता है, ताकि दृष्टि का पूरा क्षेत्र अंधेरा हो। अंधेरे क्षेत्र में जो देखा जाता है, वह निरीक्षण किए गए ऑब्जेक्ट की विचलित प्रकाश छवि है, न कि स्वयं वस्तु, इसलिए केवल ऑब्जेक्ट के अस्तित्व और आंदोलन को देखा जा सकता है, और वस्तु की ठीक संरचना को प्रतिष्ठित नहीं किया जा सकता है। हालांकि, जब निरीक्षण की गई वस्तु विषम और 1/2 तरंग दैर्ध्य से बड़ी होती है, तो विघटित किरणों के सभी स्तर एक ही समय में उद्देश्य लेंस में प्रवेश करते हैं, और ऑब्जेक्ट की संरचना को कुछ हद तक देखा जा सकता है। यद्यपि सामान्य डार्क फील्ड माइक्रोस्कोप ऑब्जेक्ट की ठीक संरचना को स्पष्ट रूप से नहीं देख सकता है, यह 0 से ऊपर के कणों के अस्तित्व और आंदोलन को अलग कर सकता है। 0 04 UM, जो कि एक विशेषता है कि साधारण माइक्रोस्कोप (अधिकतम रिज़ॉल्यूशन 0.2 um है) का उपयोग नहीं किया जाता है, और इसका उपयोग जीवित कोशिकाओं की संरचना का निरीक्षण करने के लिए किया जा सकता है।
केंद्रीय छायांकन प्लेट बनाने के लिए, साधारण माइक्रोस्कोप को एक अंधेरे क्षेत्र माइक्रोस्कोप में परिवर्तित किया जा सकता है जब तक कि कंडेनसर वियोज्य है और ब्रैकेट का व्यास डार्क फील्ड कंडेनसर को स्थापित करने के लिए उपयुक्त है। जब कोई डार्क फील्ड कंडेनसर नहीं होता है, तो एक केंद्रीय छायांकन प्लेट मोटी ब्लैक पेपर से बनाई जा सकती है और साधारण माइक्रोस्कोप के कंडेनसर के नीचे फिल्टर फ्रेम पर रखी जा सकती है, और डार्क फील्ड इफेक्ट भी प्राप्त किया जा सकता है।
माइक्रोस्कोप कंडेनसर को उच्चतम स्थिति में समायोजित करें और फोकल लंबाई को कम-शक्ति दर्पण के साथ संरेखित करें।
लेंस बैरल में देखे गए ऑब्जेक्टिव लेंस के दृश्य के क्षेत्र के बराबर बनाने के लिए लेंस बैरल से डायाफ्राम के आकार को समायोजित करें, और समायोजित करें और समायोजित करें।
मोटे काले कागज के साथ केंद्रीय प्रकाश ढाल को काटें। बाहरी रिंग का व्यास फिल्टर फ्रेम के समान है, और केंद्रीय भाग का आकार वैसा ही होता है जैसा कि डायाफ्राम के समायोजित एपर्चर के रूप में होता है (पारभासी कागज का एक छोटा सा टुकड़ा कंडेनसर के दर्पण की सतह पर रखा जा सकता है, और कागज पर प्रदर्शित होने वाला प्रकाश स्थान।
फिल्टर फ्रेम पर केंद्रीय प्रकाश ढाल डालें और नमूना का निरीक्षण करने के लिए एपर्चर खोलें।
यदि उच्च शक्ति वाले दर्पण के साथ अंधेरे क्षेत्र का निरीक्षण करना आवश्यक है, तो उच्च शक्ति वाले दर्पण के साथ ध्यान केंद्रित करने के बाद केंद्रीय प्रकाश ढाल को देखने के क्षेत्र के आकार के अनुसार रीमेक किया जाना चाहिए।
उनके द्वारा बनाई गई केंद्रीय छायांकन प्लेटों को सहेजें ताकि उनका उपयोग बाद के प्रयोगों में किया जा सके।
आवेदन की विधि। माइक्रोस्कोप के कंडेनसर ब्रैकेट पर डार्क फील्ड कंडेनसर स्थापित करें।
एक मजबूत प्रकाश स्रोत चुनें, लेकिन प्रत्यक्ष प्रकाश को उद्देश्य लेंस में प्रवेश करने से रोकें, इसलिए आम तौर पर रोशनी के लिए माइक्रोस्कोप लैंप का उपयोग करें।
सुगंधित डामर की एक बूंद कंडेनसर और नमूने के बीच जोड़ी जानी चाहिए ताकि रोशनी की रोशनी को कंडेनसर पर पूरी तरह से परिलक्षित होने से रोका जा सके, और पता लगाया ऑब्जेक्ट तक नहीं पहुंचा जा सके ताकि डार्क फील्ड रोशनी प्राप्त नहीं की जा सके।
लाइट कलेक्टर को उठाना, पता लगाए गए ऑब्जेक्ट पर लाइट कलेक्टर के फोकस को लक्षित करना, अर्थात् शंकु बीम के शीर्ष के साथ पता लगाए गए ऑब्जेक्ट को विकिरणित करना। यदि कंडेनसर क्षैतिज रूप से आगे बढ़ सकता है और एक केंद्र समायोजन उपकरण से सुसज्जित है, तो केंद्र समायोजन को पहले किया जाना चाहिए ताकि कंडेनसर के ऑप्टिकल अक्ष और माइक्रोस्कोप के ऑप्टिकल अक्ष एक सीधी रेखा में सख्ती से हो।
कंडेनसर के अनुरूप ऑब्जेक्टिव लेंस का चयन करें, फोकल लंबाई को समायोजित करें (ऑपरेशन विधि साधारण माइक्रोस्कोप के समान है), और ऑब्जेक्ट इमेज को देखे जाने के लिए खोजें।
अंत में, शिक्षण मंच पर डार्कफील्ड माइक्रोस्कोप के तहत जीवित कोशिकाओं का निरीक्षण करें। अंधेरे पृष्ठभूमि में, कोशिकाओं, नाभिक और ऑर्गेनेल की विचलित प्रकाश छवियों को देखा जा सकता है।
